原代细胞与细胞系有什么区别?

原代细胞与细胞系有什么区别?

　　依据传统定义，自组织第一次收获和接种的细胞被称为原代细胞 [Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 这类细胞直接从组织别离，生命周期有限，经数次传代后会逐步中止生长。原代细胞在有限的生命周期内需控制好细胞的最大生长空间，以坚持细胞群中基因型和表型的分歧性。

　　细胞系是不时生长、分化的细胞群，因其经过遗传改造，致使其具有无限增长的潜能。体外生长的细胞系用于医疗或科研。

　　倍增和代数有什么区别?

　　倍增是培育物中细胞总数的翻倍，通常是指细胞指数或对数生长期。代数是指细胞群从培育瓶中移出，传代培育过程的次数，传代培育的目的，是使细胞处于低密度以刺激其进一步生长。

　　接纳到的冻存细胞该如何处置?

　　收到包装箱后，立刻将冻存细胞从干冰移入液氮中冻存。此过程尽量快，以防止升温。不要将细胞贮存在-80℃，这样会对细胞形成不可挽回的伤害。

　　冻存的细胞该如何开端培育?

　　(1) 将一管细胞从液氮罐中取出，留意维护手和眼睛。

　　(2) 将冻存管快速的放入37℃水浴中，悄悄握住并旋转，直到管内物体完整消融。

　　(3) 将冻存管立刻从水浴中拿出，擦干，转入无菌环境。

　　(4) 用70%的酒精冲洗冻存管，然后擦去多余酒精。

　　(5) 翻开盖子，留意手指不要碰到里面的螺纹(留意，由于冻存管有负压，开盖时可能会有少量溢出，这是正常现象)。

　　(6) 用多聚赖氨酸(或参照阐明书)包被培育瓶。多数细胞引荐的接种密度为每平方厘米5000个细胞。

　　(7) 盖好培育瓶的盖子，悄悄摇摆培育瓶以使细胞散布平均。若需求气体交流可翻开盖子。

　　(8) 将培育瓶放入培育箱中(37℃，5%CO2，95%空气)

　　(9) 放入培育箱后第6-16小时改换一次培育基，以去除残留的二甲基亚枫和未贴壁的细胞。

　　细胞培育过程中，多久改换一次培育基?

　　这取决于细胞生长的速度。普通而言2-3天改换一次培育基，许多细胞培育实验室通常在周一，周三，周五改换培育基。

　　留意：冻存细胞复苏后，在6-16小时内改换培育基，以去除残留的二甲基亚枫和死亡的细胞。

　　能够扩增培育和再次冻存原代正常人类细胞吗?

　　这取决于细胞的类型。一些细胞类型像神经细胞，神经胶质细胞和一些生长迟缓的上皮细胞，不引荐扩增培育和再次冻存。其它的细胞类型像成纤维细胞、星形细胞、肾系膜细胞、星形胶质细胞等等，能够扩增培育和再次冻存。

　　但是，需求留意的是再次冻存的过程可能招致细胞生长性能的改动。

　　培育瓶中应该参加几体积的培育基?

　　我们引荐的用量为：T-25培育瓶5ml，T-75培育瓶15ml，T-150培育瓶30ml。